目前，測(cè)定固體制劑的多條溶出曲線愈發(fā)受到關(guān)注，其在制劑工藝研發(fā)、處方篩選、仿制藥生物等效性試驗(yàn)的預(yù)評(píng)價(jià)，以及同一品種不同來源產(chǎn)品間內(nèi)在品質(zhì)的差異評(píng)估等方面，正逐漸發(fā)揮著舉足輕重的作用 ；由此引發(fā)的在研究階段、處方篩選階段，如何高效、準(zhǔn)確、快捷地測(cè)定大批量溶出度樣品開始困擾分析人員；本人基于多年工作經(jīng)驗(yàn)，進(jìn)行梳理與歸納后，提出以下思路與觀點(diǎn)供試驗(yàn)者參考。

1、溶出度試驗(yàn)
對(duì)于片劑 / 槳板法，為使手動(dòng)取樣時(shí)不至“手忙腳亂”，可采取間隔固定時(shí)間 ( 如 30 s) 的投樣方式，這樣便可做到平行操作、從容不迫了。濾膜吸附Z受困擾。建議在第 1 取樣時(shí)間點(diǎn)前1 min，預(yù)先抽取 15 ～ 20 ml 溶出液，過濾使濾膜吸附飽和，并將濾液沿溶出杯壁緩慢注回，到取樣時(shí)間點(diǎn)后再依法取樣，取續(xù)濾液測(cè)定。

2、溶出度樣品測(cè)定方法
因輔料質(zhì)量參差不齊，尤其是薄膜衣、腸溶衣、糖衣和膠囊殼，用 UV 法測(cè)定時(shí)，可能會(huì)導(dǎo)致紫外吸收偏高，使溶出度均值出現(xiàn)正偏差 ( 甚至?xí)?0%~30%)。同時(shí)，由于原研參比制劑的輔料一般無法獲得，故輔料對(duì)測(cè)定結(jié)果的干擾無法評(píng)價(jià) 6。

因此建議采用 HPLC 法，因絕大部分輔料皆屬惰性、在反相色譜柱上不會(huì)出峰，即便出峰保留時(shí)間也較短，故皆不會(huì)干擾主成分測(cè)定。且由于HPLC 法線性范圍較寬，樣品均可無需稀釋直接進(jìn)樣測(cè)定，可省略因 UV 法測(cè)定吸光度需在 0.20 ～0.80、而稀釋樣品的繁瑣步驟，提高工作效率。

如采用 UV 法測(cè)定，為排除干擾，建議采用雙波長(zhǎng)相減法 ( Z大吸收波長(zhǎng)與遠(yuǎn)端無吸收波長(zhǎng) )。 有市售光纖溶出儀，采用了“予以校正的紫外法”。如可保證排除輔料干擾，該儀器還是值得推薦的，畢竟快速、便捷地測(cè)得一條完整曲線，對(duì)藥品內(nèi)在 品質(zhì)的研究具有實(shí)用價(jià)值。

3、如何提高 HPLC 法測(cè)定效能

3.1 樣品處理

由于 HPLC 法所需樣品量少，每一時(shí)間點(diǎn)的取樣量 1 ～ 2 ml 即可，因此、對(duì)于小規(guī)格速釋制劑 ( 不超過 10 mg)，實(shí)驗(yàn)者可根據(jù)實(shí)際情況 ( 如輔料 可溶 )，并通過觀察溶出液澄清度，酌情采用樣品液取出后無需過濾，直接置液相小瓶?jī)?nèi)、放置一段時(shí)間后進(jìn)樣測(cè)定的方式。

該法尤適用于采用自動(dòng)取樣裝置時(shí)，因?qū)π∫?guī) 格或難溶制劑，主成分皆進(jìn)行了微粉化處理，比表面能較大，故易出現(xiàn)管路與濾膜有吸附樣品。

3.2 色譜條件

色譜柱：有市售 2 ～ 5 cm 長(zhǎng)、粒徑 5 ～ 10 μm 的短分析柱，可縮短分析時(shí)間、節(jié)約流動(dòng)相用量、 降低檢測(cè)成本。

流動(dòng)相：為加快測(cè)定，完全可將已驗(yàn)證、并確定的流動(dòng)相中有機(jī)相比例提高。在保證各色譜峰完全分離的條件下，縮短保留時(shí)間。

柱溫：在考察被測(cè)樣品的穩(wěn)定性后，可適當(dāng)升高柱溫至 40 ～ 50 ℃。一般的反相色譜柱Z高承受溫度為 80 ℃，因此在 60 ℃以下試驗(yàn)毫無問題。

流速：可根據(jù)柱壓的限制，適當(dāng)提高流速至 1.5 ～ 2.0 ml/min。

進(jìn)樣量：對(duì)于小規(guī)格制劑，進(jìn)樣量可根據(jù)對(duì)照 品溶液的精密度予以靈活調(diào)節(jié)，只要儀器功能許可，100 ～ 500 μl 是完全可以的。需強(qiáng)調(diào)的是：建議采用溶出量為標(biāo)示量 10% 濃度的對(duì)照品溶液進(jìn)行精密度驗(yàn)證，以確保測(cè)定低濃度樣品時(shí)的準(zhǔn)確性。對(duì)大規(guī)格制劑，在幾近全部溶出時(shí)，由于濃度過大，會(huì)出現(xiàn)色譜柱超載或檢測(cè)器超載而導(dǎo)致峰形不佳的

情形，此時(shí)可降低進(jìn)樣量至 5 μl，使峰面積變小，滿足色譜峰精密度要求。

以上方法皆是由于峰面積小，通過縮短保留時(shí)間使色譜峰變細(xì)變尖，或通過加大進(jìn)樣量等適當(dāng)改變來提高檢測(cè)精密度，以適應(yīng)供試品溶液，并達(dá)到系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)的要求，其測(cè)試方法也應(yīng)做必要驗(yàn)證。

4、其他

4.1 使用超高速液相

如采用超高速液相，由于超高速液相色譜柱粒徑較小，樣品液若不過濾，恐堵塞色譜柱。故建議試驗(yàn)時(shí)應(yīng)先進(jìn)行驗(yàn)證。

4.2 液相軟件編程

對(duì)大批量樣品的數(shù)據(jù)處理，一定要充分利用儀器自帶的軟件功能，不建議將每一個(gè)峰面積輸入Excel 軟件計(jì)算。現(xiàn)市售主流品牌的色譜儀，皆已具備數(shù)據(jù)批量處理和打印功能，如能熟練掌握這些 功能，可大大提高工作效率。